辣椒疫霉菌效应因子RxLR23克隆与基因敲除体系建立

摘要：

在辣椒疫霉侵染寄主的过程中,病原菌能够分泌大量的RxLR效应因子,协助病原菌干扰寄主植物的抗病反应.长期以来,由于缺乏有效的定向诱变和基因置换的技术严重阻碍了关于疫霉菌的致病性的遗传研究.为了深入开展辣椒疫霉RxLR效应因子的功能研究,本项研究以辣椒疫霉菌株SD33总DNA为模板,设计引物,克隆出基因RxLR23的序列.以RxLR23基因序列为模版设计sgRNA构建pYF2.3G-ribo-sgRNA重组载体以及设计构建同源修复供体载体pBluescriptⅡKS+重组载体.利用CRISPR/cas9系统敲除基因RxLR23,经G418抗性筛选和PCR扩增验证,成功获得了基因RxLR23的4个敲除突变体.

关键词：辣椒疫霉、效应因子、CRISPR/cas9、基因敲除

所属期刊栏目：48

分类号：S436.418.1+2(病虫害及其防治)

资助基金：国家大宗蔬菜产业技术体系CARS-25-03B

在线出版日期：2017-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：491-496