10.3969/j.issn.1000-2324.2009.04.001
极端嗜热菌Thermus thermophilus HB 27中天冬氨酸激酶在大肠杆菌中表达、纯化及酶学性质研究
为获得具有热稳定性的天冬氨酸激酶,从极端嗜热菌 Thermus thermophilus HB27基因组中扩增出天冬氨酸激酶(AK)基因,构建重组质粒,并在Escherichia coli BL21 (DE3)中进行表达,得到了较高的表达量.经热处理纯化后测定重组天冬氨酸激酶(tAK)的最适pH为7.5,最适反应温度为80 ℃, 80 ℃半衰期是18 h.酶动力学分析表明tAK的KmATP为0.23 mmol/L,Vmax ATP为840.34 nmol/(L·min),KmAsp为0.95 mmol/L,VmaxAsp为190.76 nmol/(L·min).赖氨酸和甲硫氨酸对tAK活性没有抑制作用,当苏氨酸浓度大于0.5 mmol/L时,对tAK活性有明显抑制作用,并且抑制作用与苏氨酸呈现浓度依赖性.
天冬氨酸激酶、Thermu sthermophilus HB27、表达、纯化、酶学性质
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Q814(生物工程学(生物技术))
2009-12-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
479-483,488