10.3969/j.issn.1000-2324.2007.04.004
Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析
采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)检测.将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株(PCV2sdt).间接免疫荧光试验(IFA)检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光.提取全基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框(ORF1)、2号开放阅读框(ORF2)和全基因组序列扩增,得到长度分别约为999bp、749bp和1767bp左右的产物条带.将产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2.测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp.DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于95.4%~98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%~98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%~98.4%之间.
猪Ⅱ型圆环病毒、双抗体夹心ELISA、PCR、病毒分离、间接免疫荧光试验
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S852.65+1(动物医学(兽医学))
2008-04-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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509-514