鸭圆环病毒ORF3蛋白多克隆抗体的制备与应用

摘要：

鸭圆环病毒(DuCV)感染引起淋巴细胞凋亡,其ORF3蛋白是唯一具有凋亡活性的病毒蛋白,但目前ORF3特异性抗体的缺乏限制了其生物学功能的深入研究.DuCV包含基因I型和基因II型两种基因型,利用软件分析两基因型ORF3同源性,选取保守性肽段进行多肽合成,并与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联,多次加强免疫兔子,采集血清并纯化IgG后制备ORF3多克隆抗体.ELISA检测发现此抗体能特异性与ORF3保守肽段反应,并具有较高的效价,间接免疫荧光(IFA)显示此抗体能特异性识别两基因型ORF3蛋白,但并不能用于western blot检测,说明此多抗主要识别ORF3空间构象的表位.总之,我们成功制备了特异性识别两种基因型DuCV ORF3蛋白的抗体,为今后深入探究DuCV ORF3蛋白的生物学功能提供了良好的研究工具.

关键词：鸭圆环病毒、ORF3蛋白、多肽合成、多克隆抗体

分类号：Q511(蛋白质)

资助基金：国家自然科学青年基金3160130233;国家大学生创新训练项目201810452012;山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室开放课题基金SDPDI201802;河南科技学院大学生创新训练计划项目201710467009,2017CX031

在线出版日期：2019-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：36-40