蜗牛消化酶提取河蟹微孢子虫基因组反应条件的优化

摘要：

PCR是目前能够特异地检测河蟹微孢子虫的最灵敏的方法.河蟹微孢子虫孢子壁坚厚不易破碎,对许多化学物质有很强的抵抗性,常规的核酸抽提方法效果不够理想.本文通过对比PCR的结果,研究蜗牛消化酶对DNA抽提效果的影响,确定了酶作用的最佳反应条件,提高了PCR检测河蟹微孢子虫的灵敏性.结果显示:蜗牛消化酶提取微孢子虫DNA的酶促反应温度为37℃,底物浓度为20 mg,酶的使用浓度为酶/底物重量比400 mg/g,酶促反应时间为4h.实验表明,使用蜗牛消化酶处理样品,有助于更加灵敏地检测出微孢子虫.该研究结果将有助于提高河蟹微孢子虫病的检验检测能力,对河蟹微孢子虫的检疫和防治具有积极意义.

关键词：河蟹微孢子虫、DNA抽提方法、PCR

所属期刊栏目：38

分类号：Q173(水生生物学)

资助基金：江苏省科技计划现代农业项目BE2016392

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：35-39