CoCl2诱导黑素瘤A375细胞上皮间质转化、糖酵解及SB-431542干预研究

摘要：

目的 探讨CoCl 2刺激的黑素瘤A375细胞上皮间质转化和糖酵解的作用机制及SB-431542对此的干预作用.方法 选用本团队前期已证实的安全有效浓度的CoCl2(50～150μmol/L)刺激黑素瘤A375细胞,建立体外低氧模型,Western Blot检测HIF-1α、Nodal、上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、Vimentin、MMP2及糖酵解各组分蛋白LDH-A、LDH-B的表达,以明确CoCl 2对A375细胞上皮间质转化和糖酵解的影响作用.随后研究SB-431542对Nodal-ALK4-ALK7介导A375细胞上皮间质转化和糖酵解反应的抑制作用:本部分拟筛选安全有效浓度的Nodal受体抑制剂(SB-431542)分别作用于CoCl 2介导的低氧模型,通过MTT实验确定SB-431542的安全浓度用于后续实验.Western blot检测SB-431542对CoCl 2诱导细胞上皮间质转化和LDH活化相关蛋白的影响;琼脂糖凝胶电泳检测LDH同工酶谱的变化情况;此外,使用Western blot检测Nodal及其受体(ALK4、ALK7)的表达.结果 CoCl2可显著上调细胞上皮间质转化相关蛋白Vimen-tin、MMP2和促瘤相关蛋白Nodal及其受体(ALK4、ALK7)的表达,且表达与作用浓度成正相关;CoCl2能促进糖酵解活化相关蛋白表达,其中LDH-A表达上调,LDH-B的表达受到抑制(P<0.05).MTT结果显示10μmol/L SB-431542处理48 h对细胞的增殖影响最小(P<0.05);SB-431542可抑制Vimentin、MMP2和Nodal及其受体ALK4、ALK7表达(P<0.05);促进糖酵解途径的相关蛋白LDH-A的表达下调(P<0.05),抑制糖酵解途径相关蛋白LDH-B的表达上调(P<0.05).结论 CoCl 2可诱导黑素瘤细胞上皮间质转化及糖酵解.SB-431542可通过抑制CoCl 2诱导的Nodal-ALK4-ALK7信号通路抑制与上皮间质转化及糖酵解相关分子的表达.

关键词：黑素瘤细胞、二氯化钴、SB-431542、上皮间质转化、糖酵解

所属期刊栏目：41

分类号：R739.5(肿瘤学)

在线出版日期：2020-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1016-1020