Klotho通过激活PI3K/AKT通路抑制肾小球系膜细胞内质网应激介导的细胞凋亡研究

摘要：

目的 Klotho对高糖作用下肾小球系膜细胞凋亡的影响及作用机制.方法 体外培养肾小球系膜细胞,高糖作用于肾小球系膜细胞诱导其凋亡,设置空白对照组、模型组(500μmol/L高糖处理)、不同浓度(50、100μg/L)Klotho组,LY295002(PI3K抑制剂)组(10μmol/L).MTT法检测细胞的活力;流式细胞术检测细胞的凋亡率;ELISA检测细胞的培养液中TNF-α和IL-6的浓度变化;DHE检测ROS;特定试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH-PX)含量;Western blot法检测GRP78、CHOP、Caspase12表达水平以及AKT的磷酸化.结果 高糖组能够显著降低肾小球系膜细胞活力,提高ROS及凋亡率,LDH、MDA含量显著增加,SOD、GSH-PX活性显著下降,同时诱导TNF-α和IL-6分泌及增加了GRP78、CHOP、Caspase 12的表达,而P-AKT/AKT表达降低,差异有统计学意义(P＜0.01).不同浓度Klotho和高糖同时作用于肾小球系膜细胞时,细胞存活率逐渐上升,ROS含量及凋亡率逐渐下 降,LDH、MDA含量逐渐下降,SOD、GSH-PX活性随之上升,TNF-α和IL-6的含量及GRP78、CHOP、Caspasel2表达下降,P-AKT/AKT增加,差异有统计学意义(P＜0.01).LY295002组上述检测指标与Klotho组相反.结论 Klotho提升了高糖作用下肾小球系膜细胞活力,降低凋亡率,加强细胞抗氧化能力,减少细胞炎性反应,Klotho可能部分通过激活PI3K/AKT通路抑制细胞的内质网应激,从而对肾小球系膜细胞发挥保护作用.

关键词：Klotho、肾小球系膜细胞、凋亡、PI3K/Akt、内质网应激

所属期刊栏目：40

分类号：R587.2(内分泌腺疾病及代谢病)

在线出版日期：2020-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1010-1016