基于CRISPR/Cas9技术敲除NFE2L1对肺癌A549细胞增殖的影响

摘要：

目的 利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO技术构建核因子E2相关因子1(NFE2L1)缺失的肺癌A549细胞,并观察NFE2L1敲除对肺癌A549细胞增殖的影响.方法 利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO基因编辑技术,将重组NFE2L1-gRNA表达载体转入肺癌A549细胞,嘌呤霉素筛选NFE2L1缺失的肺癌A549细胞,并通过DNA测序和Western Blot实验验证获得的A549细胞.采用CCK8和克隆形成实验观察敲除NFE2L1对肺癌A549细胞增殖的影响.结果DNA测序和Western Blot实验结果表明,成功获得稳定敲除NFE2L1的肺癌A549细胞.CCK8和克隆形成实验均表明敲除NFE2L1促进肺癌A549细胞的增殖.结论 利用CRISPR/Cas9-2hitKO技术成功构建NFE2L1缺失的A549细胞,敲除NFE2L1能够促进肺癌细胞增殖.

关键词：NFE2L1、CRISPR/Cas9、肺癌A549细胞

所属期刊栏目：39

分类号：Q812(生物工程学(生物技术))

资助基金：四川省科技计划项目2017JY0130;南充市校科技战略合作专项项目NSMC20170407;四川省大学生创新创业训 练计划项目201710634018

在线出版日期：2019-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1318-1322