BTG2基因干扰重组慢病毒的制备及在A549细胞中的表达鉴定

摘要：

目的：用已构建好的 BTG2-siRNA重组的慢病毒表达载体包装成具有感染性的慢病毒颗粒，获得稳定BTG2-siRNA表达的 A549细胞。方法构建的 BTG2-siRNA 慢病毒表达载体，经测序后证实与标准序列一致。将BTG2-siRNA慢病毒表达载体与其他两种慢病毒包装载体质粒共转染293T细胞，获得BTG2基因siRNA重组慢病毒。感染A549细胞后，用25μg/mL的嘌呤霉素筛选稳定干扰BTG2表达的A549细胞。 CCK8法检测感染BTG2干扰慢病毒的A549细胞的增殖能力变化。结果 Western blot检测提示感染BTG2-siRNA慢病毒的A549细胞总蛋白中BTG2表达要明显低于正常的A549细胞。 CCK8实验显示，感染BTG2干扰慢病毒的A549细胞的增殖能力增加。结论成功制备了BTG2基因siRNA重组慢病毒颗粒，感染A549细胞后可检测到BTG2蛋白的表达明显降低。为进一步研究BTG2基因在恶性肿瘤中的生物学功能与相关机制的研究奠定了基础。

关键词：BTG2、慢病毒、A549细胞

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81272498,81301631;重庆市博士后科研项目特别资助Xm201350

在线出版日期：2015-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：795-798