10.3969/j.issn.1004-0501.2010.05.005
结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达载体的构建及鉴定
目的 构建结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达栽体.方法 PCR技术扩增获得rpoB基因,连接入pBluescript Ⅱ SK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法 将rpoB基因定向连接到真核表达载体pQE-Trisystem中,构成pQE-Tri-rpoB,将pQE-Tri-rpoB转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,脂质体转染P815细胞后,以RT-PCR方法 检测mRNA表达.结果 构建了重组质粒pQE-Tri-rpoB,RT-PCR结果 证明rpoB可在P815细胞中转录.结论 成功构建了结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达栽体,rpoB基因可以在P815细胞中表达.
结核分支杆菌、rpoB基因、利福平、表达载体
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Q78(基因工程(遗传工程))
2010-07-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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