一种椎间盘组织总RNA提取的改良方法

摘要：

目的 改进传统常规法在椎间盘组织中总RNA提取,获得高质量的椎间盘组织总RNA.方法 健康成年Newsland白兔,完整取出椎间盘组织,随机分RNA传统方法组和酶消化改良组.传统组,按Trizol法提取总RNA;酶消化改良组,加入0.2%Ⅱ型胶原酶,置于细胞培养葙消化数小时,加入含小牛血清的PBS液终止,离心收集细胞.余步骤同传统组.结果 传统组,电泳结果未见28S和18S条带,5S条带部分可见;A260/280比值在1.5左右,蛋白多糖污染重.而酶消化组,电泳结果可见清晰的28S、18S和5S条带,且28S条带的亮度约是18S的两倍;3.260/280比值在1.8～2,0之间,无蛋白污染,此法提取的RNA,逆转录后可用于扩增β-actin基因.结论 酶消化改良法可望成为椎间盘组织总RNA提取的好方法.RNA片断完整,纯度高,无蛋白污染,不影响后续基因表达(RT-PCR)的分析,并且重复性好,可以推广.

关键词：椎间盘组织、Ⅱ型胶原酶、RNA提取

所属期刊栏目：30

分类号：Q5-3

在线出版日期：2010-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1687-1689