阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因真核表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的 构建并鉴定阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因的真核表达裁体.方法 Trizol试剂提取阴道毛滴虫株基因组总RNA,RT-PCR扩增粘附蛋白65-3基因,定向克隆入pMD-18T线性质粒,重组子经双醇切、PCR鉴定及测序分析.鉴定正确的重组质粒pMD-18T-ap65-3和pcDNA3.1(+)空质粒径BamH Ⅰ和Xho Ⅰ限制性内切酶双酶切后,凝胶电泳纯化回收目的 片段.将粘附蛋白65-3基因亚克隆入pcDNA3.1(+)载体并进行筛选和鉴定.结果 成功克隆出阴道毛滴虫粘附蛋白65-3基因,序列分析发现该基因的开放阅读柜长为1704bp,与GenBank上公布的粘附蛋白65-3基因序列比较,同源性高迭99.6%.经PCR鉴定,限制性酶切鉴定及测序鉴定,正确构建出重组质拉pcDNA3.1-ap65-3.结论 成功克隆出粘附蛋白65-3基因并构建出真核表达质粒pcDNA3.1-ap65-3,为进一步研究该基因的功能及滴虫的致病机制奠定实验基础.

关键词：阴道毛滴虫、粘附蛋白65-3基因、真核表达载体

所属期刊栏目：30

分类号：R382.2+1;Q78(医学寄生虫学)

在线出版日期：2009-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：460-462