人5-羟色胺2c受体基因实时荧光定量PCR方法的建立

摘要：

目的 建立5-羟色胺2c受体(5-HTR2c)基因mRNA表达水平的TaqMan real-time PCR检测方法.方法 以β-actin为内参基因,根据GenBank中人5-HTR2c及β-actin基因序列,分别设计了2套特异性引物和TaqMan探针,接着对反应的退火温度、引物浓度、探针浓度、Mg2+浓度进行优化,然后以优化的条件建立相对定量标准曲线,并对该方法的稳定性进行了分析.结果 5-HTR2c及β-actin基因的real-time PCR扩增效率分别为99.9%和100.0%;相对定量标准曲线的CT值线性范围分别为12.2～35.1和11.5～31.5,相关系数分别为0.999及1.000;批内及批间变异系数<8.0%.结论 本研究所建立的针对5.HTR2c mRNA表达水平的Taqman real-time PCR检测方法具有扩增效率高、稳定性好等特点,为进一步探索5-HTR2c的功能及其mRNA表达水平的变化和各种疾病发生、发展的相关性提供了有用的方法学基础.

关键词：5-羟色胺2c受体、TaqMan探针、real-time PCR

所属期刊栏目：29

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：四川省应用基础项目2006J13-006-05

在线出版日期：2008-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：503-505