半滑舌鳎源哈维氏弧菌分泌蛋白HutZ的功能鉴定及免疫原性

摘要：

哈维氏弧菌为我国海水鱼类养殖过程中的常见病原,为了进一步探究哈维氏弧菌的致病机制,本实验分别从前期筛选到的哈维氏弧菌强毒株H2LB1和弱毒株H1SAI3中提取胞外产物(ECPs),并通过蛋白质组学进行差异蛋白鉴定.从中选取了哈维氏弧菌强毒株特异性蛋白HutZ为研究对象,对其功能和免疫原性开展深入研究.首先利用qRT-PCR检测了哈维氏弧菌在不同铁源培养基培养条件下的HutZ基因表达量差异,进一步将克隆HutZ基因连接到原核表达载体上,并在大肠杆菌中成功表达出重组HutZ蛋白.将纯化的HutZ蛋白与血红素共孵育,检测发现该蛋白能够结合血红素并改变其光吸收峰.将HutZ蛋白乳化后免疫半滑舌鳎2次,以间接血凝法检测免疫后1-7周的血清效价,同时在免疫4周后进行攻毒检测其免疫保护率.研究表明,HutZ蛋白免疫后的半滑舌鳎抗体效价最高可达1:128,攻毒免疫保护率达73.3％,说明HutZ蛋白可作为开发预防半滑舌鳎感染哈维氏弧菌的亚单位疫苗的有效候选抗原.

关键词：半滑舌鳎;哈维氏弧菌;HutZ蛋白;免疫

所属期刊栏目：46

分类号：S941.42(水产保护学)

资助基金：国家自然科学基金;天津市应用基础项目;天津师范大学博士基金

在线出版日期：2022-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：116-125