锦鲤墨蝶呤还原酶基因的克隆、表达和定位分析
为探究SPR在锦鲤体色形成中的作用,实验利用RACE技术获得spr cDNA全长序列,并分析其时空表达模式,同时利用Western blot和免疫组织化学方法检测SPR蛋白在皮肤、鳍条和鳞片中的分布和表达情况.结果显示,spr cDNA全长879 bp,包含132 bp和134 bp的5′和3′非编码区,开放阅读框510 bp,编码170个氨基酸残基.氨基酸序列比对和系统进化树分析显示,锦鲤SPR具有保守的adh_short_C2结构域,与金鱼相似性高达97.7%.spr在各组织中均有表达,其中皮肤的表达量最高.spr在锦鲤个体发育的4个阶段表现为先降后升.纯红、纯白及红白3种体色锦鲤皮肤、鳞片和鳍条中spr mRNA和蛋白表达水平基本一致,在纯红锦鲤皮肤中表达量最高,红白锦鲤白色皮肤、鳞片和鳍条的表达量最低.SPR组织定位分析显示,红色锦鲤和白色锦鲤皮肤中均检测到阳性信号,其中红色皮肤阳性信号强度高于白色皮肤.研究表明,spr可能与锦鲤红/黄色素细胞的分化和形成具有一定相关性,参与了锦鲤体色的形成.
锦鲤、spr、基因克隆、蝶啶代谢、体色
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Q785;S917.4(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金青年科学基金31402294;河南省重点研发与推广专项182102110164, 192102110192;农业农村部休闲渔业重点实验室开放基金课题2019N06
2020-04-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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