团头鲂tf和tfr1a基因启动子克隆及转录调控分析

摘要：

为探索鱼类转铁蛋白基因tf和转铁蛋白受体基因tfr1a的转录调控机制,本实验以团头鲂为研究对象,在其全基因组数据库中获取tf和tfr1a基因序列,对2个基因候选启动子区转录因子结合位点及CpG岛进行预测,通过PCR方法克隆得到tf和tfr1a基因近端启动子区不同长度片段,连接至pGL3-Basic/pEGFP-1载体,瞬时转染入Hela细胞,并采用双荧光素酶报告基因检测系统进行检测.结果发现,团头鲂tf基因启动子区无CpG岛位点,而tfr1a基因启动子区有2个CpG岛位点.成功构建9个tf和10个tfr1a不同长度启动子片段的重组质粒,经双荧光素酶报告基因系统检测发现,tf启动子核心区域为?268～+56 bp,且?1308～?1102 bp片段可能存在正调控该基因表达的转录因子结合位点;tfr1a启动子核心区域为?224～+48 bp,且+48～+92 bp可能存在抑制该基因转录的负调控元件,而?1229～?1219 bp区域可能存在促进tfr1a基因表达的正调控转录因子结合位点.

关键词：团头鲂、tf基因、tfr1a基因、启动子、转录调控

所属期刊栏目：44

分类号：Q785;S917.4(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31572613;湖北省协同创新中心建设专项资金2016ZXPY04

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：528-538