中国明对虾肌肉组织蛋白质双向电泳技术体系的建立

摘要：

为了探索并建立中国明对虾的肌肉蛋白双向电泳体系,实验将中国明对虾的肌肉组织溶解处理后,通过固相pH梯度胶条等电聚焦、SDS-PAGE垂直电泳对蛋白质进行分离,对不同的裂解液配方、IPG胶条的pH范围及其长度、等电聚焦程序、上样量等进行了优化,并分别利用银染和考染方法进行染色,应用PDQuest软件对图谱进行了初步分析.结果显示,中国明对虾肌肉蛋白的等电点主要位于4～7之间,裂解液中添加硫脲、CHAPS、DTT等,可以增加对虾肌肉蛋白的提取率；采用17 cm,pH 4～7的中型IPG胶条,主动水化上样120μg,适当延长除盐时间和等电聚焦时间,搭建盐桥,采用浓度为12.5％的二向分离胶和硝酸银染色,能有效提高双向电泳(2-DE)图谱中蛋白点的分离度和分辨率；建立的中国明对虾肌肉蛋白双向电泳体系具有良好的重复性和稳定性.

关键词：中国明对虾、肌肉蛋白质、双向电泳、蛋白质组学

所属期刊栏目：37

分类号：S917(水产基础科学)

资助基金：国家"十二五"科技支撑计划2012BAD29B06;浙江省杰出青年科学基金项目R3110345;辽宁省食品安全重点实验室暨辽宁省高校重大科技平台开放课题LNSAKF2011029

在线出版日期：2013-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：288-296