血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与初步应用

摘要：

用血卵涡鞭虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,经常规融合、间接ELISA方法筛选,将所得阳性克隆再经3次亚克隆后,共获得3株针对血卵涡鞭虫的单克隆抗体(2B2、3G4、4G7),单克隆抗体亚类鉴定表明,三者为IgG类抗体.用筛选的杂交瘤细胞株制备小鼠腹水抗体,其细胞上清及腹水效价分别为5.12×10-4和8.00×10-4.进一步利用单克隆抗体建立间接荧光抗体方法对单抗特异性进行鉴定,阳性虫体被染上黄绿色荧光,而正常梭子蟹血淋巴则未被染色.用单克隆抗体和多克隆兔抗血清以羊抗鼠HRP-IgG为酶标抗体,建立了检测血卵涡鞭虫的双抗体夹心ELSA方法,该方法对血卵涡鞭虫阳性标本检测符合率为100%.结果表明,制备的单克隆抗体效价高、特异性好,可用于血卵涡鞭虫的早期临床诊断.

关键词：三疣梭子蟹、血卵涡鞭虫、单克隆抗体、间接荧光抗体法、双抗体夹心ELISA法

所属期刊栏目：35

分类号：Q176;S941.5(水生生物学)

资助基金：浙江省自然科学基金;浙江省大学生科技创新项目;浙江省科技厅项目

在线出版日期：2011-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：780-786