鲤肌肉肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的分子克隆

摘要：

肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase, MBSP)是最近发现的一种蛋白酶.该酶参与肌原纤维蛋白的降解及鱼糜制品弹性的下降.但是,对该酶一级结构的研究,迄今为止,未有报道.本文根据已测定的鲤MBSP N-末端氨基酸序列以及丝氨酸蛋白酶活性中心保守序列设计兼并引物,结合RT-PCR技术实现了MBSP基因片段的扩增.再根据克隆到的MBSP片段序列设计基因特异引物,用于MBSP基因的5'和3'末端快速扩增.综合以上结果,鲤MBSP的全长被确定.序列分析表明,MBSP cDNA含有一732 bp的开放阅读框,编码243个氨基酸残基,其中信号肽长度为21个氨基酸残基.组成丝氨酸蛋白酶活性中心的氨基酸残基(His61, Asp107和Ser197)在MBSP中保守存在.成熟MBSP含有222个氨基酸残基,分子量为24.5 ku,比其天然蛋白的分子量30 ku略小.成熟MBSP的等电点为10.43.鲤MBSP与鲫MBSP,猪胰蛋白酶,牛胰蛋白酶,美洲鲽胰蛋白酶的同源性分别为80.6%, 55.8%, 55.3%和53.9%.而与仓鼠肌肉中具有胰凝乳蛋白酶性质的蛋白酶的同源性为39.2%.MBSP有高含量的赖氨酸残基(11.93%),此特性可能与该酶的肌原纤维结合特性有关.

关键词：鲤、克隆、肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶、同源性

所属期刊栏目：31

分类号：Q785;S965.116(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金;集美大学优秀青年骨干教师支持计划

在线出版日期：2007-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：423-430