酶标甲胺磷交联反应的pH及缓冲体系优化

摘要：

采用碳二亚胺法制备酶标农药(过氧化氢酶标记甲胺磷),以酶标农药对鸡肝酯酶的抑制率和抑制后酶标农药-酯酶复合物中标记酶酶活为指标,对制备酶标甲胺磷交联反应的pH和所用缓冲液类型进行优化,并对其偶联率进行了分析.结果发现,pH增加有效促进了甲胺磷和标记酶分子之间的交联,而缓冲体系类型对此交联反应的影响相对较小.然而随之持续上升的偶联率带来的空间位阻效应也逐渐明显.随着pH增加,标记物抑制率和抑制后的标记酶活均呈现先增加后略下降的趋势,且分别在pH为6.0和5.5时达到峰值,其峰值时偶联率分别为24和22.综合考量,采用pH 6.0的2-(N-吗啉)乙磺酸一水合物(MES)缓冲液制备的酶标农药,其抑制率和标记酶活均达到较优值,分别为45.29％和47.67U,此时其偶联率约为24.

关键词：酶标甲胺磷、交联反应、pH、抑制率、酶活

所属期刊栏目：52

分类号：TQ925+.9(其他化学工业)

资助基金：国家自然科学基金项目31101283;上海市科技兴农重点攻关项目沪农科攻字2015第2-4号;上海市高校青年教师培养计划项目slg11021

在线出版日期：2016-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3-8