骨桥蛋白基因真核表达载体构建及对结肠癌细胞的作用

摘要：

目的:构建骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)基因真核表达载体,转染人结肠癌细胞SW480,分析其对SW480细胞株增殖及生存能力的作用.方法:构建重组表达载体pEGFP-N1/OPN,经测序鉴定无误后,转染人结肠癌SW480细胞.RT-PCR检测SW480细胞转染后OPN mRNA表达;Western blot检测SW480细胞转染后OPN蛋白表达量;Cell Counting Kit-8(CCK-8)测定细胞增殖;软琼脂克隆形成实验观察细胞的锚定非依赖性生长能力.结果:pEGFP-N1/OPN转染SW480后,OPN基因获得很好转录,OPN蛋白表达增高,转染OPN后SW480细胞增殖率(光吸收值)显著高于转染阴性组(P＜0.05),软琼脂克隆形成速度增快,数量明显多于对照组和空载体组(P＜0.05).结论:OPN基因真核表达载体pEGFP-N1/OPN构建成功,OPN具有促进SW480细胞增殖、存活的作用,为进一步研究OPN作用机制奠定了重要基础.

关键词：骨桥蛋白、结肠癌、增殖、存活

所属期刊栏目：34

分类号：R78;R73

资助基金：四川省科技厅科研项目07JY029-134;四川省教育厅科研项目07ZB110

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1-3