10.3969/j.issn.1671-3885.2007.01.005
用于酵母双杂交的α-防御素HNP-1成熟肽重组诱饵载体的构建和鉴定
目的:构建和转化人α-防御素HNP-1成熟肽的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究其相互作用蛋白分子打下基础.方法:用RT-PCR扩增HNP-1成熟肽基因,将该基因片断与腺病毒载体pBluescript-SK-Ⅱ定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;回收目的片断,将其连接入酵母表达载体pGBKT7,构建重组诱饵表达质粒pGBKT7-HNP-1,测序鉴定.缺陷培养方法检测重组诱饵载体有无毒性和自激活作用.结果序列分析表明HNP-1成熟肽重组诱饵表达质粒构建成功,重组诱饵表达质粒对酵母细胞无毒性作用,无自激活效应发生.结论构建用于酵母双杂交的α-防御素HNP-1成熟肽重组诱饵载体,为找出与人α-防御素HNP-1成熟肽相互作用蛋白分子打下了基础.
α-防御素、HNP-1、成熟肽、酵母双杂交
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R3(基础医学)
美国中华医学会基金98-681;国家自然科学基金30470763;30671963
2007-07-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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