问号状赖型钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及真核表达研究

摘要：

目的:构建赖型钩端螺旋体lag42基因真核表达载体并转染哺乳动物细胞,为进一步研究奠定基础.方法:分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板PCR扩增目的基因.构建lag42基因与质粒pcDNA3.1A+的重组真核表达质粒,克隆筛选并测序;通过脂质体介导将重组质粒转染入COS7细胞,用RT-PCR检测转染结果.结果:不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;PCR、双酶切及测序证实pcDNA3.1A+-lag42构建成功;经RT-PCR检测证实重组质粒转染成功.结论:赖型钩体具有编码LAg42膜蛋白的基因,构建完成真核表达载体pcDNA3.1A+-lag42,并成功转染COS7细胞.

关键词：钩端螺旋体、lag42基因、克隆、转染

所属期刊栏目：29

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30471546

在线出版日期：2007-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：6-8