中药视神经保护有效成分筛选的方法学研究

摘要：

@@ 目的:(1)建立大鼠视网膜神经细胞体外培养模型;(2)建立视网膜神经节细胞(RGCs)培养模型;(3)用噻唑兰比色法(MTT法)测试不同培养时间视网膜神经细胞及RGCs存活率;(4)绘制体外培养视网膜神经细胞和RGCs存活曲线.方法:(1)取出生72h内的SD乳鼠视网膜,制成细胞悬液,放于已包被多聚鸟氨酸和层粘连蛋白的培养皿中,加20%EMDM培养液、于5%二氧化碳孵箱中培养,分别于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(2)在混合培养的视网膜神经细胞中加入5'-溴-2'-脱氧脲苷(Brdu),并于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(3)利用羊抗鼠IgG和小鼠抗大鼠Thy1.1抗体纯化视网膜神经节细胞,分别于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;(4)采用MTT法测定体外培养的视网膜混合细胞和RGCs在体外培养4小时,24小时,48小时的存活率,绘制细胞生长曲线.

机标关键词：中药、视神经保护、有效成分筛选、视网膜神经细胞、体外培养、视网膜神经节细胞、细胞存活、培养模型、细胞生长曲线、噻唑兰比色法、观测、二氧化碳孵箱、存活率、多聚鸟氨酸、层粘连蛋白、细胞悬液、细胞体外、培养时间、抗体纯化、混合细胞

所属期刊栏目：27

分类号：R28;R98

资助基金：中国科学院资助项目30271581

在线出版日期：2005-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

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