干扰ACACA基因对猪原代肌卫星细胞增殖和成脂转分化过程的影响

摘要：

[目的]探究乙酰辅酶A羧化酶α(acetyl-CoA carboxylase α,ACACA)对猪原代肌肉卫星细胞(muscle satellite cells,MSCs)增殖凋亡以及成脂转分化的影响.[方法]通过体外培养MSCs模拟猪肌内脂肪的形成过程,根据ACACA基因序列构建3条小干扰RNA,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)筛选出干扰效率最高的siRNA进行转染.成功干扰MSCs内ACACA的表达后,分别通过qRT-PCR、CCK-8细胞增殖实验、流式细胞术、油红O染色和检测甘油三酯(TG)等方法对MSCs增殖、凋亡以及转分化时期脂滴形成效果进行评估.[结果]在增殖期干扰ACACA,MSCs内细胞周期标志基因Cyclin D1(P<0.05)、Cyclin E(P<0.0001)以及抗凋亡基因BCL-2(P<0.05)的表达量下调,促凋亡基因BAX(P<0.05)的表达量上调;在对MSCs进行成脂转分化诱导作用下,MSCs具有向脂肪细胞转分化的能力,而干扰ACACA后,MSCs中脂滴极显著减少(P<0.0001).[结论]干扰ACACA后抑制猪MSCs的增殖,促进其凋亡,并且对成脂转分化时期脂滴的形成具有抑制作用.研究结果为后续研究ACACA对肌内脂肪的影响及猪肉制品调控机制研究提供实验参考和基础数据.

关键词：乙酰辅酶A羧化酶α、猪骨骼肌、原代肌卫星细胞、siRNA、转分化

所属期刊栏目：41

分类号：S828;Q75(家畜)

资助基金：国家重点研发计划;四川省科技计划项目;四川省科技计划项目;四川省科技计划项目;四川省科技计划项目;国家生猪技术创新中心资助

在线出版日期：2023-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：335-343,388