版纳微型猪近交系B4GALNT2基因真核表达载体构建及亚细胞定位分析

摘要：

[目的]研究异种器官移植免疫排斥相关基因B4GALNT2的亚细胞定位情况.[方法]以版纳微型猪近交系(BMI)为试验对象,通过RT-PCR方法获得B4GALNT2基因cDNA序列,运用分子克隆技术构建B4GALNT2和报告基因EGFP的重组真核表达载体pEGFP-C1-B4GA LNT2,将其转染猪肾上皮细胞PK15进行瞬时表达,同时用Mito Tracker和Hoechst33342荧光染料分别对线粒体和细胞核染色,通过EGFP示踪检测B4GALNT2在PK15细胞中的表达和定位.[结果]成功构建了BMI B4GALNT2基因的绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C1-B4GALNT2,转染PK15细胞后主要在细胞质中检测到绿色荧光蛋白的表达,试验结果与PSORTⅡserver网站的预测一致.[结论]B4GALNT2蛋白主要定位于细胞质,揭示该蛋白主要在细胞质中发挥其功能作用.

关键词：版纳微型猪近交系、β1、4-N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(B4GALNT2)、Sda抗原、真核表达、亚细胞定位

所属期刊栏目：37

分类号：S828.2;Q78(家畜)

资助基金：国家自然科学基金项目31660650;云南省应用基础研究计划面上项目2017FB066

在线出版日期：2019-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：215-220