苦荞黄酮醇合酶基因FtFLS4的克隆及其在大肠杆菌的表达

摘要：

[目的]克隆苦荞FtFLS4基因,深入研究其酶学活性.[方法]根据苦荞转录组数据克隆FtFLS4基因,对其进行生物信息学分析;构建原核表达载体pET-30b(+)-FtFLS4并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,对表达产物进行活性鉴定.[结果]FtFLS4基因的cDNA为1026 bp,编码341个氨基酸,编码蛋白具有属于 α-ODD家族中黄酮醇合酶的结构特征,且其三维模型能与3种二氢黄酮醇底物进行分子对接;FtFLS4在大肠杆菌BL21(DE3)中实现可溶性表达,酶学分析表明该重组蛋白具有将二氢黄酮醇催化为黄酮醇的活性.[结论]克隆得到FtFLS4基因,实现其在大肠杆菌中有活性的表达.

关键词：苦荞、黄酮醇合酶、基因克隆、原核表达、活性鉴定

所属期刊栏目：36

分类号：Q785;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31500289

在线出版日期：2018-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：611-617,664