农杆菌介导的2mG2-epsps 基因转化玉米自交系18-599R 幼胚的研究

摘要：

【目的】对农杆菌介导的抗草甘膦新基因2mG2-epsps 转化玉米18-599R 幼胚的体系进行优化，以获得具有明显草甘膦抗性的转基因植株。【方法】以玉米18-599R 幼胚为受体，采用农杆菌介导法，对转化时的预处理条件、菌液浓度×浸染时间、草甘膦筛选浓度设置处理，以优化转化体系；并用 PCR、实时荧光定量 PCR 和喷洒草甘膦鉴定外源基因在转基因植株中的表达情况。【结果】热激处理对抗性愈伤率没有明显的提高作用，离心处理会降低抗性愈伤率；菌液浓度为 OD600＝0．6，浸染时间为10 min 时，平均抗性愈伤率最高，为37．33％；草甘膦浓度为2．0 mmol／L 是比较理想的筛选浓度；实验共得到46株再生植株，5株 PCR 检测呈阳性，阳性率为10．87％；实时荧光定量 PCR 表明外源基因在 T2代植株的根、茎、叶中均有表达；对 T2代转基因植株喷洒1．5 g／L 的草甘膦，表现出耐受性。【结论】实验成功将2mG2-epsps 导入18-599R 基因组，并获得了明显的草甘膦抗性。

关键词：2mG2-epsps、18-599R、农杆菌介导法、幼胚

分类号：S513(禾谷类作物)

资助基金：转基因专项子项目。

在线出版日期：2015-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：245-250