枇杷果肉过氧化物酶的分离纯化及其性质研究

摘要：

枇杷果肉制成丙酮粉,通过硫酸铵沉淀分级分离、透析、DEAE-纤维素离子交换柱层析纯化,获得两个酶活力峰,第二活力峰的酶制剂经过PAGE和SDS-PAGE电泳获得单一纯的过氧化物酶(PODⅡ),纯酶比活力为710.5 U/mg.酶亚基分子量为22.6 kDa,等电点pI为3.6.酶的动力学研究表明:酶的最适pH为5.0,在pH 2.6～10区域较稳定;酶最适温度是35 ℃,对热敏感,高于45 ℃以上酶的稳定性差.酶对愈创木酚和H2O2的表观Km值分别为20.58和12.04 mmol/L,以愈创木酚为底物时,酶比活力最大,其次是苯酚、邻苯二酚、对苯二酚和间苯二酚,酶未能催化以焦性没食子酸为底物的氧化反应.Al3+、Mn2+、Zn2+和Hg2+对酶有抑制作用,Mg2+、Ca2+、Cu2+、Fe2+、Ba2+和Pb2+对酶有激活作用;半胱氨酸等12种化合物对酶活力均有不同程度的抑制作用,在防止或减轻枇杷采后的酶促褐变中将起到重要的作用.

关键词：枇杷、过氧化物酶、分离纯化、酶学性质、酶促褐变

所属期刊栏目：25

分类号：Q554.6(酶)

资助基金：福建省自然科学基金X0650085;福建省教育厅科研项目JB04175

在线出版日期：2008-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：419-424