转Bt基因植物中杀虫蛋白的酶联免疫检测技术研究Ⅱ.Bt杀虫晶体蛋白抗体的制备

摘要：

用碳酸钠裂解液(50mmol/L Na2CO3,50?mmol/L EDTA,pH 10)从Bacillus thuringiensis HD-1的孢晶混合物中分离提取杀虫蛋白的基础上,进一步用聚丙烯酰胺凝胶制备电泳技术纯化杀虫蛋白,获得了高纯度的杀虫蛋白作为抗原,用于免疫家兔制备抗体.比较了不同抗原注射剂量的免疫效应和免疫过程中(不同注射时间)抗体生成量的变化.结果表明,供试的二种抗原注射剂量对抗体的效价无明显影响,随着免疫次数的增加抗体效价不断上升,最终获得了用琼脂双扩散测定效价为1/120的抗血清.Bt杀虫蛋白的免疫原性低.抗血清中的抗体免疫球蛋白(Ig),首先经硫酸铵分级沉淀粗提,再用DEAE-52纤维素柱层析提取纯化,获得了高纯度的IgG,为抗体的酶标记和ELISA检测杀虫蛋白等研究提供了高特异性的Bt抗体.研究的结果为Bt菌HD-1杀虫蛋白抗体的制备提供了依据.

关键词：苏云金杆菌HD-1、Bt晶体蛋白、免疫、抗体、效价、免疫球蛋白

所属期刊栏目：23

分类号：S433.1(病虫害及其防治)

资助基金：四川省科技厅资助项目

在线出版日期：2005-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：163-167