石莼多糖裂解酶原核表达方法比较

摘要：

比较不同原核表达载体和受体重组转化表达石莼多糖裂解酶基因的效果.将人工合成的石莼多糖裂解酶基因片段分别酶切接入原核表达载体pColdⅠ质粒和pET-28a(+)质粒,得到重组质粒pColdⅠ-859和pET-28a(+)-859(859代表石莼多糖裂解酶基因),经双酶切测序鉴定后,分别将质粒pColdⅠ-859转入大肠杆菌RP(DE3)感受态细胞,质粒pET-28a(+)-859转入大肠杆菌BL21(DE3)LysS中表达.试验结果显示,前者没有明显表达目的蛋白,后者表达的蛋白经分离纯化、电泳鉴定和Western Blot分析证明目的蛋白表达量较高.本试验经对比研究获得了能充分表达石莼多糖裂解酶的原核表达系统,为批量制备低成本高纯度的石莼多糖裂解酶蛋白提供了参考.

关键词：石莼多糖裂解酶、原核表达、载体、大肠杆菌

所属期刊栏目：37

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金面上资助项目.41576163;国家重点研发计划项目2016YFC1402105;国家海洋局重点实验室开放研究基金资助项目MATHAB2017010

在线出版日期：2018-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：842-846