黄鳝血清转铁蛋白多克隆抗体的制备及检测

摘要：

为实现黄鳝血清转铁蛋白基因的原核表达并制备其多克隆抗体,利用基因特异性引物从黄鳝肝脏cDNA中扩增黄鳝转铁蛋白的C端序列,亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建pET/Tf-C重组表达载体;转化大肠杆菌BL21(DE3)后进行IPTG诱导.利用Ni离子亲和层析技术纯化Tf-C蛋白,并免疫新西兰兔制备多克隆抗体;通过间接ELISA技术和组织蛋白印迹对制备的多克隆抗体进行检测.试验结果表明,成功构建pET/Tf-C原核表达载体,并实现了蛋白的表达和纯化;制备的多克隆抗体效价大于1∶25 600,并能特异性地识别来源于黄鳝不同组织的血清转铁蛋白.研究结果对黄鳝血清转铁蛋白功能的研究奠定了基础.

关键词：黄鳝、转铁蛋白、多克隆抗体、制备

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分类号：S917.4(水产基础科学)

资助基金：国家大学生创新创业训练计划项目201510489007;湿地生态与农业利用教育部工程研究中心开放课题KF2015016

在线出版日期：2017-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：220-223