香鱼肝胰腺cDNA文库的构建和鉴定

摘要：

以香鱼正常肝胰腺为材料,构建cDNA文库.初始文库库容大于1.3×107 cfu/ml,扩增文库的滴度大于1.1×106cfu/ml,平均插入片段约为1.0 kb.从文库中随机挑选297个cDNA克隆测序,得到232个功能已知EST序列,功能包括代谢、蛋白质合成、细胞与机体防御、信号转导以及细胞结构与运动等5个方面.随机测序获得香鱼弹性蛋白酶(Elastase,ELA)编码序列,cDNA序列全长957个核苷酸,3'-末端具有polyA尾,编码一个由268个氨基酸组成28.7 ku大小蛋白.序列分析表明,香鱼ELA的N端15个氨基酸为信号肽,成熟肽具有丝氨酸蛋白酶家族的典型结构特征.香鱼ELA与斜带石斑鱼、大西洋鳕和金头鲷的ELA氨基酸序列同源性最高,达76%～77%.系统进化树分析表明,香鱼ELA与其他鱼类ELA紧密成簇.RT-PCR检测显示,香鱼ELA基因mRNA在香鱼肝胰腺、脾、肠组织中均大量表达.

关键词：cDNA文库、香鱼、肝胰腺、弹性蛋白酶、序列分析

所属期刊栏目：30

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：长江学者和创新团队发展计划项目IRT0734

在线出版日期：2011-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：11-16