10.3969/j.issn.1003-1111.2007.04.003
鲶生长激素基因cDNA的克隆和原核表达
从脑垂体中提取总RNA,用RT-PCR扩增并克隆到鲶鱼的生长激素(GH)基因cDNA.分析其核苷酸序列和推测的氨基酸序列,结果显示:鲶鱼生长激素基因的开放阅读框(ORF)包括603个核苷酸;编码200个氨基酸;其中包括22个氨基酸的信号肽和178个氨基酸的成熟肽.把GH成熟肽的cDNA克隆入表达载体pET-28a,用IPTG诱导重组蛋白的表达,其表达量超过细胞蛋白总量的50%,主要为不溶性的包含体.细菌裂解液沉淀溶于8 mol/L尿素后,用固定化金属配体亲和层析纯化,获得分子量为22.5 kD的单一蛋白带.
鲶、生长激素基因、饲料添加剂
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Q786(基因工程(遗传工程))
河南省杰出青年科学基金0512001800
2007-05-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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195-199