人β-神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的构建人β-神经生长因子基因(β-NGF)的真核细胞表达载体,为运用进行基因治疗和细胞移植的研究奠定基础.方法采用RT-PCR方法从人脑肿瘤旁组织的mRNA中扩增人β-神经生长因子的基因片段,将目的基因、真核表达载体pcDNA3同时经HindⅢ和Apa双酶切、纯化、连接、转化及筛选而构建重组载体pcDNA3-β-NGF;经酶切和测序对重组体进行分析和进一步鉴定.结果RT-PCR产物琼脂糖电泳结果显示:在预期位置有阳性条带.重组载体经酶切、测序等分析插人的基因片段为表达β-NGF的基因.结论人β-NGF基因重组真核细胞表达载体pcDNA3-β-NGF构建成功,为进一步开展β-NGF基因治疗脑部疾患、脊髓损伤修复等研究奠定基础.

关键词：β-神经生长因子、RT-PCR、克隆、真核表达载体

所属期刊栏目：12

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：纽约中华医学基金

在线出版日期：2005-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2-5