10.3969/j.issn.1000-7083.2014.01.023
Stella基因真核表达载体的构建及其对小鼠胚胎干细胞多能性的影响
构建Stella基因真核表达质粒,转染小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESC)并初步探讨Stella对减数分裂起始相关基因(Stra8)及胚胎干细胞多能性的影响.通过RT-PCR扩增目的基因,并连接至真核表达载体pEGFP-C1,利用重组质粒转染小鼠胚胎干细胞.对转染细胞进行荧光检测,确认Stella的表达,并利用免疫荧光及PCR检测转染细胞基因表达情况.酶切鉴定及测序分析表明成功构建含Stella基因的重组真核表达质粒,过表达Stella对ES细胞的增殖和形态学特征、进入减数分裂阶段的相关基因及其多能性基因的表达影响并不显著.故此得出结论:Stella在小鼠胚胎干细胞中能够正确表达,但对ES细胞的分化、Stra8基因的表达及其多能性基因的表达并无显著影响.
胚胎干细胞、减数分裂、多能性
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Q782;Q786(基因工程(遗传工程))
教育部博士点基金RFDP,20120204110030;国家自然科学基金31272518
2016-10-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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