叠氮溴化丙锭-羟基萘酚蓝-环介导等温扩增法检测畜禽肉中单核细胞李斯特菌

摘要：

将叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)、羟基萘酚蓝(hydroxynaphthol blue,HNB)与环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术相结合,建立一种可视化PMA-HNB-LAMP方法快速检测畜禽肉中单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes).结果表明,当PMA终质量浓度为5.0μg/mL、孵育和曝光时间均为15 min时,可有效抑制105 CFU/mL的单核细胞李斯特菌死菌DNA的聚合酶链式反应扩增,而对活菌DNA的扩增不具有抑制作用.LAMP反应体系中HNB终浓度为210μmol/L时,检测显色结果肉眼可见.该方法的纯菌液灵敏度为2.4×102 CFU/mL,人工污染肉制品的检出限为2.3×104 CFU/mL.分别采用国标法、PMA-HNB-LAMP法和HNB-LAMP法检测20份市售畜禽肉样,3种方法的单核细胞李斯特菌检出率分别为5％、10％和20％.PMA-HNB-LAMP法在一定程度上可解决LAMP法的假阳性问题,并且具有操作简单、可视性强的优点.

关键词：单核细胞李斯特菌、叠氮溴化丙锭、羟基萘酚蓝、环介导等温扩增、畜禽肉

分类号：TS251.7(食品工业)

资助基金：湖北省自然科学基金计划项目;江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室开放基金项目

在线出版日期：2020-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：48-52