10.7506/rlyj1001-8123-201809006
应用微滴式数字聚合酶链式反应定量检测 牛肉制品中的猪源性成分
参照GB/T 25165—2010《明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法实时荧光聚合酶链式反应法》,以牛的生长激素(growth hormone,GH)基因和猪的朊蛋白(prion protein,PRNP)基因2种核基因为靶基因合成特异性引物和探针.理论推导单位质量牛肉的GH基因与猪肉PRNP基因拷贝数之比为一固定值,通过微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)方法对该固定值进行检测和验证,并以该固定值对牛肉/猪肉人工混合样本和市售牛肉制品中的猪肉成分进行定量检测.结果表明:该方法具有良好的准确性及可重复性;牛肉中掺杂猪肉质量分数在5%~99%范围内时,检测结果绝对误差小于1.28%,变异系数小于6.5%,猪肉成分的回收率为99.09%~102.80%;20份牛肉制品中,4份检出猪肉成分,其中3份的相对含量为29.19%~98.15%,1份为0.12%(低于本方法检出限5%).因此,ddPCR方法可以较好地应用于牛肉制品中掺杂猪肉成分的定量检测.
微滴式数字聚合酶链式反应、牛肉、猪肉、定量检测
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TS207.3(食品工业)
河北省科技计划项目17275507D;温州市科技计划项目N20170007
2018-11-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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