沙门氏致病菌标准阳性模板的构建及实时荧光定量聚合酶链式反应检测

摘要：

目的：构建重组质粒作为标准阳性模板，建立食品中沙门氏致病菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法。方法：以致病性沙门氏菌invA基因上特异性片段为目标，设计并合成引物和TaqMan探针，将目标片段连接到PGM-T载体上构建重组质粒，建立实时荧光定量检测体系，并考察方法的灵敏性、特异性、重复性和准确性。结果：构建出致病性沙门氏菌特异性基因片段的重组质粒，能够作为实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法的标准阳性模板，标准曲线方程为Y=－3.151 lgX＋42.86（R2=0.999），灵敏度80拷贝反应体系，能特异区分沙门氏菌与类型的细菌，同时，批内和批间的变异系数均小于5%，具有良好的重复性。结论：本方法能够实现对食品中致病性沙门氏菌进行定性定量检测。

关键词：沙门氏致病菌、标准阳性模板、实时荧光定量聚合酶链式反应、TaqMan探针

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：2013年度国家星火计划项目2013GA690155；南通市科技计划项目HS2012007

在线出版日期：2015-02-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：34-37