"二加二"法建立金线莲类原球茎培养新体系

摘要：

本研究以金线莲组培苗茎段为试材,采用"二加二"法,即"两步诱导"(1.利用暗培养诱导出白化茎段;2.由白化茎段诱导类原球茎)加"两步增殖"(1.新诱导的类原球茎在诱导培养基上培养3周;2.利用L16(45)正交试验优选增殖培养方案)的方法,研究外植体来源、外植体处理方式、暗培养时间、培养基及附加成分对类原球茎诱导的影响,以及培养时间、光照强度、紫外光照射时间对类原球茎增殖的影响,并比较"二加二"法与传统单步法的培养效果.结果表明,适宜白化茎段诱导类原球茎的培养基为MS+2.5mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA+1.0mg/L S3307.黑暗腋生白化茎段是最佳外植体,最佳处理方式为整个茎段平放,3周暗培养得到的白化茎段能够显著提高类原球茎的诱导率.增殖培养5个因素对结果的影响顺序为:NH4+/NO3?>NAA浓度>6-BA浓度>S3307浓度>蔗糖浓度.最佳配比为MS+0.5mg/L S3307+4.0mg/L 6-BA+0.4mg/L NAA+NH4+/NO3?(15mmol:45mmol)+蔗糖40g/L,可获得增殖鲜重为246.90g/L.增殖培养最佳时间6周.光照强度500 lx和253.7nm紫外光每天照射6h连续6周适宜类原球茎的增殖和总黄酮的积累.利用"二加二"法建立了金线莲类原球茎高效培养新体系,该体系诱导率、初始材料扩大倍数、增殖倍数均高于传统单步诱导法.92％的类原球茎能够稳定增殖,不发生分化和愈伤组织化.

关键词：金线莲、类原球茎、高效体系、诱导、总黄酮

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分类号：Q949.9;S567.239(植物学)

资助基金：河北省高等学校科学技术研究项目Z2015134;国家自然科学基金项目81473578

在线出版日期：2019-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：314-322