文心兰PAD4基因克隆及表达分析

摘要：

为了研究文心兰(Oncidium hybridum)抗病相关基因PAD4在文心兰抗病种质资源培育中的功能,采用RT-PCR结合RACE法,从巧克力文心兰(Oncidium Sharry Baby'Sweet Fragrance')中克隆得到一条全长2214 bp的基因的cDNA序列,开放阅读框长1894 bp,预测可编码647个氨基酸,5′UTR长度为65 bp,3′UTR长度为255 bp.生物信息学分析表明:PAD4编码的蛋白属于水解酶超家族,有6个跨膜螺旋,无信号肽,亚细胞定位预测其主要定位于细胞质膜上.系统进化树表明,文心兰PAD4与同为兰科植物的小兰屿蝴蝶兰(Phalaenopsis equestris)、铁皮石斛(Dendrobium catenatum)、深圳拟兰(Apostasia shenzhenica)亲缘关系最近.同源分析结果显示,与铁皮石斛的PAD4蛋白同源性最高(78.08％).实时荧光定量PCR分析显示,PAD4在文心兰不同组织部位中都有表达,在假鳞茎中的表达量最高,其次是下端叶,在根中的表达量最低.接种软腐病病原菌显示,PAD4在感病文心兰中表达量上调,侵染后4 h时快速响应并达到最高值.SA(salicylic acid)和CaCl2都能够诱导PAD4的表达,都在24 h时达到最高峰.研究表明,PAD4基因可能在文心兰抗病过程中有重要作用.

关键词：文心兰、抗病、PAD4、基因克隆、表达分析

所属期刊栏目：39

分类号：S31(作物生物学原理、栽培技术与方法)

资助基金：福建省重大科技专项"福建特色园艺作物种质优异基因资源的挖掘与种质创新"2015NZ-0002-1

在线出版日期：2019-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：2436-2445