玳玳花瓣脂氢过氧化物裂解酶基因cDNA的克隆及原核表达

摘要：

以玳玳花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术,克隆了玳玳HPL基因cDNA全长,全长为1 776 bp,其中包含52 bp的5’非编码区,224 bp的3’非编码区,1 500bp的编码区(编码499个氨基酸,分子量为55.7 ku).将该HPL基因cDNA编码区的核苷酸序列及所推导的氨基酸序列与其他植物的HPL基因cDNA序列进行比较,推断玳玳花瓣HPL属于13-HPL类.通过PCR扩增得到了玳玳HPL基因组全长.测序结果显示玳玳HPL基因中包含1个长2 374 bp的内含子.将分离出来的玳玳HPL基因cDNA的编码区序列插入pET-15b载体上构建原核表达载体,在细菌BL21细胞中进行原核表达.结果表明:该编码区片段可在原核细胞中大量表达,其表达产物分子量大小约为55 ku,与13-HPL蛋白的分子量55.7 ku相符.本研究为下一步利用HPL基因cDNA进行遗传转化研究奠定基础,将为花卉香味的遗传改良提供一条新途径.

关键词：玳玳(Citrus aurantium)、脂氢过氧化物裂解酶、cDNA全长、原核表达

所属期刊栏目：38

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2017-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：673-681