铁皮石斛HDR基因克隆及真菌诱导子对其表达和生物碱含量的影响

摘要：

以铁皮石斛原球茎为材料,采用同源克隆的方法,成功得到了铁皮石斛Do-HDR基因的全长,并通过qPCR对其相对表达量进行分析.结果表明:Do-HDR基因全长1 784 bp(GenBank登录号KJ946381),5'UTR为40 bp,3'UTR为361 bp,开放阅读框为1 382 bp,编码460个氨基酸.生物信息学分析结果表明,该基因编码的蛋白为稳定的亲水蛋白,不具有跨膜结构,不含信号肽,定位于内质网.采用灭活的尖孢镰刀菌菌液作为诱导子,分别以0、100、200、500、1 000 mg/L的浓度培养3d后测定总生物碱含量,结果表明,总生物碱含量呈现先上升后下降的趋势;当诱导子浓度为200 mg/L时,总生物碱含量达到最大值.在此基础上通过qPCR分析Do-HDR基因的相对表达量,结果发现Do-HDR基因相对表达量在诱导子浓度为200 mg/L时也到达最大值.因此,推测Do-HDR基因与生物碱的合成与积累有关.

关键词：铁皮石斛、Do-HDR基因、基因克隆、qPCR、生物碱

所属期刊栏目：36

分类号：S682.31(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：福建省科技厅农业科技平台建设项目2008N2001

在线出版日期：2015-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：680-686