10.3969/j.issn.1000-2561.2014.05.016
国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应体系优化及引物快速筛选
以国兰杂交品种(系)为材料,采用L16(45)正交试验设计对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、模板及引物等5个重要影响因素进行优化,确定国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应的最优反应体系为(25 μL体系):TaqDNA聚合酶,1U; Mg2+,1.8 mmol/L; dNTPs,0.08 mmol/L;模板DNA,100 ng;引物,上下游各0.3 mmol/L;10×PCR Buffer,2.5 μL.此外,本试验采用DNA混合池技术(DNA pooling)快速筛选SRAP引物,从180对SRAP引物组合中筛选出39对扩增产物丰富、多态性高的引物组合.与常规方法相比,该技术明显缩短试验周期、节约了模板用量,为快速高效筛选SRAP引物提供了新思路.
SRAP-PCR、体系优化、DNA混合池、引物筛选
35
S682.31(观赏园艺(花卉和观赏树木))
国家科技支撑计划项目2007BAD07B01
2014-07-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
925-932