10.3969/j.issn.1000-2561.2013.10.009
橡胶树HbJAZ3突变体蛋白的原核表达及纯化
植物JAZ蛋白是茉莉酸信号调控途径的关键环节之一.HbJAZ3基因是橡胶树乳管细胞中编码JAZ蛋白的基因家族成员之一.本文采用原核表达和定点突变技术,构建了pET28a(+)-JAZ3、pET28a(+)-JAZ3-ZIM-mut(缺失ZIM结构域中TIFY基序)和pET28a(+)-JAZ3-Jas-mut(缺失Jas结构域的保守氨基酸FLEKRK)的His标签融合蛋白表达载体,并成功转化大肠杆菌Rosetta(DE3).在37℃条件下,用1 mmol/L IPTG诱导2h能够诱导目的蛋白以包涵体的形式大量表达.通过镍柱纯化了目的蛋白,获得了HbJAZ3及其ZIM结构域和Jas结构域的突变体蛋白,为进步一鉴定乳管细胞茉莉酸信号途径的关键环节打下了良好基础.
巴西橡胶树、HbJAZ3、原核表达、定点突变技术、蛋白纯化
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S794.1(森林树种)
中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项1630022013004;现代农业产业技术体系建设专项CARS-34-GW1;国家自然科学基金31170642
2013-11-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
1902-1906