龙眼GPX基因的克隆、原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析

摘要：

采用RT-PCR与RACE相结合的方法,从龙眼胚性愈伤组织中克隆了长947 bp含有完整开放阅读框的龙眼DlGPX cDNA序列(GenBank登录号为EU364813)和长度为1 736 bp的DNA序列(GenBank登录号为EU680970).其编码1个含有168个氨基酸的蛋白质.DlGPX基因中含有5个内含子,均符合真核生物内含子通用的GT-AG法则.生物信息学分析显示:该蛋白为亲水的酸性蛋白质,定位于叶绿体；与其他植物的GPX有较高的同源性.将该基因构建成原核表达载体,经IPTG诱导表达了1个分子量约为23 ku的蛋白.利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究该基因在龙眼体胚发生发育过程中的表达情况,结果显示,从松散型胚性愈伤组织到不完全胚性紧实球形结构阶段,DlGPX mRNA的转录水平逐渐升高,在胚性紧实球形结构阶段降到最低水平,子叶形胚阶段又上升到与不完全胚性紧实球形结构阶段相当的水平.

关键词：龙眼、体细胞胚胎发生、GPX、克隆、生物信息学、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：34

分类号：S667.2;Q78(果树园艺)

资助基金：国家自然科学基金项目31071787、31201588、30471204;高等学校博士学科点专项科研基金项目20093515110005;福建省科技平台建设项目2008N2001

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1483-1489