10.3969/j.issn.1672-3619.2023.09.008
has_circ_0001859靶向miR-16抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和转移的机制研究
目的 探讨hsa_circ_0001859靶向miR-16抑制类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(RASFs)增殖和转移的机制研究.方法 选取2019年6月-2020年7月于成都八一骨科医院进行治疗的RA患者40例为RA组,同时选取本院体检中心健康志愿者40例为对照组.培养RASFs细胞,将si-NC、si-hsa_circ_000_1859、pcDNA-NC、pcDNA-hsa_circ_0001859、miR-NC、miR-16 mimics、si-hsa_circ_0001859+anti-miR-NC、si-hsa_circ_0001859+anti-miR-16 分别转染至 RASFs,记为 si-NC 组、si-hsa_circ_0001859 组、pcDNA-NC 组、pcDNA-hsa_circ_0001859 组、miR-NC 组、miR-16组、si-hsa_circ_000 1859+anti-miR-NC 组、si-hsa_circ_0001859+anti-miR-16 组.RT-qPCR 检测 hsa_circ_0001859、miR-16表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞增殖、迁移和侵袭;Western blot法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测hsa_circ_0001859和miR-16的靶向关系.结果 RA组织中hsa_circ_0001859表达水平(2.66±0.36)较对照组(1.00±0.13)明显升高,miR-16表达水平(0.40±0.04)较对照组(1.00±0.15)明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05).si-hsa_circ_0001859组hsa circ_0001859表达水平、细胞存活率、细胞迁移和侵袭数量、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达[(0.38±0.03)、(46.93±6.39)%、(109.38±17.39)个、(138.95±35.73)个、(0.37±0.03)、(0.40±0.04)、(0.38±0.03)]较si-NC 组[(1.00±0.10)、(98.54±9.35)%、(247.98±35.73)个、(223.94±22.48)个、(0.90±0.09)、(0.90±0.08)、(0.89± 0.08)]降低,差异均有统计学意义(P均<0.05).miR-16组miR-16表达水平[(2.57±0.25)]较miR-NC组[(1.02± 0.11)]升高,细胞存活率、细胞迁移及侵袭数量、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达[(48.48±5.11)%、(126.94± 11.14)个、(118.40±12.23)个、(0.35±0.05)、(0.41±0.04)、(0.38±0.03)]较 miR-NC 组[(99.98±10.56)%、(284.59± 33.68)个、(249.47±25.78)个、(0.89±0.08)、(0.92±0.09)、(0.89±0.08)]降低,差异均有统计学意义(P均<0.05).miR-16 mimics组WT-hsa_circ_0001859的相对荧光素酶活性[(0.40±0.04)]较miR-NC组[(1.00±0.10)]降低,差异有统计学意义(P<0.05).si-hsa_circ_0001859 组 miR-16 表达水平[(2.75±0.31)]较 si-NC 组[(1.00±0.10)]升高,pcDNA-hsa_circ_0001859组miR-16表达水平[(0.39±0.03)]较pcDNA-NC组[(1.00±0.09)]降低,差异均有统计学意义(P均<0.05).si-hsa_circ_0001859+anti-miR-16 组 miR-16 表达水平[(0.36±0.04)]较 si-hsa_circ_0001859+anti-miR-NC 组[(1.01±0.11)]降低,细胞存活率、细胞迁移和侵袭数量、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达[(98.32±9.11)%、(255.76±30.03)、(279.74±33.92)、(0.90±0.09)、(0.91±0.08)、(0.88±0.08)]较 si-hsa_circ_0001859+anti-miR-NC 组[(44.87±5.39)%、(98.58±8.21)、(102.46±14.79)、(0.37±0.03)、(0.39±0.03)、(0.35±0.03)]升高,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 抑制hsa_circ_0001859靶向提高miR-16表达,抑制RASFs增殖和转移.
hsa_circ_0001859、miR-16、类风湿关节炎、增殖、迁移和侵袭
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R593.22(全身性疾病)
四川省中医药管理局科研项目2018BY013
2023-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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