10.3969/j.issn.1672-3619.2023.05.013
LncRNA XIST通过miR-494-3p/MTUS1轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响
目的 探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(lncRNA XIST)调控miR-494-3p/微管相关肿瘤抑制基因1(MTUSI)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响.方法 2020年2月-2022年2月期间共收集濮阳市人民医院51对乳腺癌组织及癌旁组织.人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR3均购自中国科学院上海细胞库.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot分别检测乳腺癌癌组织、癌旁组织及人正常乳腺上皮细胞MCF-10A、人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR3中XIST、miR-494-3p、MTUS1蛋白表达;将 MCF-7 细胞分为 Ctrl 组、pcDNA 组、pcDNA-XIST组、pcDNA-XIST+mimic NC 组、pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic组,qRT-PCR检测细胞中XIST、miR-494-3p表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;Western blot检测细胞中MTUS1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报基因实验分别验证XIST和miR-494-3p、miR-494-3p和MTUS1的关系.结果 与癌旁组织比较,乳腺癌组织中XIST、MTUS1蛋白表达降低,miR-494-3p表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),与MCF-10A细胞比较,MCF-7细胞中XIST、MTUS1蛋白表达量降低,miR-494-3p表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05).与pcDNA组比较,pcDNA-XIST组XIST、MTUS1蛋白表达量升高[(1.03±0.12)vs.(1.92±0.14)、(0.24±0.01)vs.(0.88±0.07)],miR-494-3p 表达量降低[(1.02±0.08)vs.(0.35±0.03)],差异均有统计学意义(t=11.82、22.17、19.21,P均<0.001);与 pcDNA-XIST+mimic NC 组比较,pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic组XIST表达量[(1.94±0.13)vs.(1.93±0.15)]变化差异无统计学意义(t=0.12,P=0.904),miR-494-3p表达升高[(0.36±0.04)vs.(0.78±0.07))],MTUS1 蛋白表达量降低[(0.89±0.08)vs.(0.45±0.04)],差异均有统计学意义(t=12.76、12.05,P均<0.001);与 pcDNA组比较,pcDNA-XIST组 OD450值、划痕愈合率、侵袭细胞数、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P均<0.05).XIST靶向调控miR-494-3p/MTUS1 轴;与 pcDNA-XIST+mimic NC 组比较,pcDNA-XIST+miR-494-3p mimic 组 OD450值、划痕愈合率、侵袭细胞数、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,差异有统计学意义(P均<0.05).结论 过表达XIST可能通过海绵化miR-494-3p来上调MTUS1表达,进而抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭与迁移,促进细胞凋亡.
长链非编码RNA X染色体失活特异转录本、miR-494-3p、微管相关肿瘤抑制基因1、乳腺癌、增殖
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R737.9(肿瘤学)
河南省科技攻关计划项目LHGJ201913116
2023-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共9页
652-658,682,后插2