华支睾吸虫分泌排泄蛋白诱导宿主细胞自噬参与致病的分子机制

摘要：

目的 探讨华支睾吸虫分泌排泄蛋白(CsESP)诱导宿主细胞自噬参与致病的机制.方法 建立华支睾吸虫感染的小鼠模型,分为感染组和对照组,感染组每鼠经口灌胃囊蚴50个,对照组每鼠灌入等体积生理盐水.体外培养人肝星状细胞LX-2,采用不同浓度CsESP(0、1、5、10、20、30、50 μg/mL)刺激LX-2细胞,Western blot检测感染组和对照组中小鼠肝组织及活化的LX2细胞中自噬相关分子微管相关蛋白1轻链3(LC3B)和自噬相关蛋白16L1(ATG16L1)的蛋白水平.采用CsESP与自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-MA)、氯喹(CQ)或自噬诱导剂Earle's平衡盐溶液(EBSS)、雷帕霉素(Rapamycin)共同刺激LX-2细胞,分为Control(正常细胞)组、二甲基亚砜(DMSO)组、CsESP(50 μg/mL)+3-MA(10 mmol/L,预处理 2 h)组、3-MA(10 mmol/L)组、CsESP(50 μg/mL)+CQ(30 μmol/L,预处理8 h)组、CQ(30 μmol/L)组、CsESP(50 μg/mL)+EBSS(预处理3 h)组、EBSS组、CsESP(50 μg/mL)+Rapamycin(200 nmol/L,预处理8 h)组和Rapamycin(200 nmol/L)组共十组.Western blot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷蛋白70核糖体蛋白S6激酶(P70S6K)、p-P70S6K以及Jun氨基末端激酶(p-JNK1/2)和磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38(p-P38)的表达情况.结果 与对照组相比,20、50 μg/mL的CsESP刺激LX-2细胞后LC3B Ⅱ/Ⅰ均升高,差异有统计学意义(t=4.674、6.754,P＜0.05).与 3-MA 组相比,CsESP+3-MA 组 LC3B Ⅱ/Ⅰ、p-JNK1/2、p-P70S6K 和P70S6K的表达水平明显升高,p-mTOR的水平下降,差异均有统计学意义(t=8.51、9.42、18.39、5.24、7.89,P均＜0.05).与CQ组相比,CsESP+CQ组P62、p-P38的表达和p-JNK1/2升高,差异均有统计学意义(t=6.25、12.14、13.48,P均＜0.05).与 Rapamycin组相比,CsESP+Rapamycin组 LC3B Ⅱ/Ⅰ、P62、p-P38、p-P70S6K、P70S6K和 p-mTOR 的蛋白水平均明显升高,差异有统计学意义(t=16.36、11.92、8.68、13.92、17.62、8.89,P均＜0.05).与EBSS组相比,EBSS+CsESP组p-JNK1/2升高,p-P38、p-P70S6K、P70S6K和p-mTOR的水平均明显下降,差异有统计学意义(t=10.24、7.36、67.37、19.84、39.53,P均＜0.05).结论 华支睾吸虫感染和CsESP均可诱导自噬的发生,CsESP可能通过调控mTOR/P70S6K通路激活自噬,促进肝脏疾病的发生.

关键词：华支睾吸虫、排泄蛋白、自噬、微管相关蛋白1轻链3

所属期刊栏目：23

分类号：R383.22(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;广东省基础与应用基础研究联合基金

在线出版日期：2023-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：164-168