miR-3941抑制securin的表达对神经胶质瘤细胞的影响

摘要：

目的 探讨miR-3941对神经胶质瘤发生发展的影响以及可能的分子机制.方法 为了明确miR-3941的功能,本研究将细胞分为三组,一组不做任何处理(U251细胞组),一组转染NC mimics作为对照组(NC mimics组),一组转染miR-3941 mimics(miR-3941 mimics组).为了研究securin对miR-3941功能的影响,又将细胞分为三组,一组转染 miR-3941 mimics(miR-3941 mimics 组),一组共转染 miR-3941 mimics 和空质粒作为对照(miR-3941 mimics+NC 组),一组共转染 miR-3941 mimics 和 securin 过表达质粒(miR-3941 mimics+ov-securin 组).采用 RT-qPCR检测人正常胶质细胞和胶质瘤U251细胞中miR-3941的表达情况.CCK-8实验和Transwell实验检测过表达miR-3941、过表达miR-3941同时过表达securin对胶质瘤U251细胞增殖、迁移和侵袭影响.Western blot检测过表达miR-3941、过表达miR-3941同时过表达securin对胶质瘤U251细胞中securin蛋白表达的影响.双荧光素酶报告实验分析miR-3941对securin的靶向作用关系.结果 与人正常胶质细胞相比,胶质瘤U251细胞中miR-3941相对表达水平显著下调,差异有统计学意义(t=57.42,P＜0.05).CCK-8实验表明在培养48和72h时U251细胞组、NC mimics 组以及 miR-3941 mimics 组之间细胞增殖差异有统计学意义(F=424.50、956.20,P 均＜0.05);miR-3941 mimics组的增殖明显低于NC mimics组(P＜0.05).Trans well实验表明U251细胞组、NC mimics组以及miR-3941 mimics组的细胞迁移和侵袭差异有统计学意义(F=6 361.00、5 608.00,P均＜0.05);和NC mimics组相比,转染miR-3941 mimics组迁移和侵袭细胞数显著减少(P＜0.05).双荧光素酶实验结果显示,与野生型securin 3'-UTR报告载体共转染后,U251组、miR-3941 mimics组和miR-3941 inhibitor组之间荧光素酶活性差异有统计学意义(F=649.10,P＜0.05),而与突变后的securin 3'-UTR报告载体共转染后,以上三组荧光强度无明显变化,差异无统计学意义(F=0.55,P=0.605).Western blot检测发现转染miR-3941 mimics的胶质瘤U251细胞中securin蛋白水平明显降低.miR-3941 mimics 组、miR-3941 mimics+NC 组以及 miR-3941 mimics+ov-securin 组在 48 和 72 h 时间点细胞增殖差异有统计学意义(F=541.40、516.80,P均＜0.05),三组细胞迁移和侵袭差异有统计学意义(F=3 611.00、9 684.00,P均＜0.05).与miR-3941 mimics+NC组相比,miR-3941 mimics+ov-securin组细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著增强(P均＜0.05).结论 miR-3941可通过抑制securin的表达抑制神经胶质瘤的发生发展.

关键词：胶质瘤、miR-3941、增殖、迁移、侵袭

所属期刊栏目：22

分类号：R739.4(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;内蒙古自然科学基金项目;希思科-石药肿瘤研究基金

在线出版日期：2023-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1461-1466,1595,封2